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CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay

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CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(CTG)

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CellTiter-Glo®Luminescent Cell Viability Assay (CellTiter-Glo®发光法细胞活力检测试剂盒,简称CTG ) 是通过对 ATP 进行定量测定来检测培养物中活细胞数目的一种均质快速检测方法。ATP 是活细胞新陈代谢的一个指标。Promega的 CellTiter-Glo® 检测试剂盒为多孔板而设计,是进行自动化高通量筛选 (HTS)、细胞增殖和毒性分析的理想选择。检测步骤就是将单一试剂 (CellTiter-Glo® 试剂 ) 直接加入含有血清的培养细胞中,无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。在 384 孔板上,加入试剂并混合后,10 分钟内,该系统可检测到的每个孔内的细胞数最低为 15 个。

均质的“加样 - 混合 - 检测”操作方案使得细胞裂解和产生的发光信号与存在的 ATP 量成正比,而 ATP 量直接与培养物中的细胞数量成正比。

CellTiter-Glo® 检测试剂盒产生一种 " 辉光型 " 的发光信号,半衰期一般大于 4 小时,因细胞类型和培养基而异。 由于信号半衰期长,不需要使用自动进样器,就可灵活地进行

连续的或批量的多孔板处理。独特的均质检测方案避免了那些需要多个步骤的 ATP 检测方法可能会引入的误差。

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CTG电子竞技俱乐部 - 搜狗百科

子竞技俱乐部 - 搜狗百科CTG(全称Change The Game)电子竞技俱乐部隶属北京成辰文化传播有限公司,于2020年5月正式成立,核心创始人为知名职业选手Running蔡成。网页微信知乎图片视频医疗汉语问问百科更多»登录帮助首页任务任务中心公益百科积分商城个人中心CTG电子竞技俱乐部编辑词条添加义项同义词收藏分享分享到QQ空间新浪微博CTG(全称Change The Game)电子竞技俱乐部隶属北京成辰文化传播有限公司,于2020年5月正式成立,核心创始人为知名职业选手Running蔡成。中文名称CTG电子竞技俱乐部展开运动项目绝地求生展开成立时间2020年5月展开外文名称Change The Game展开现任主教练王宇洋展开参考资料:1. CTG电子竞技俱乐部正式成立!创始核心:Running蔡成玩加电竞[引用日期2020-05-20]2. 2019春季赛冠军VC战队停止运营 CTG收购其PCL资格玩加电竞[引用日期2020-05-21]3. 原TSG选手SIASA正式转会至CTG电子竞技俱乐部 转会费40万人民币玩加电竞[引用日期2020-06-18]4. CTG电子竞技俱乐部官宣PCL秋季赛大名单 天天正式加入玩加电竞[引用日期2020-10-07]词条标签:电竞组织免责声明搜狗百科词条内容由用户共同创建和维护,不代表搜狗百科立场。如果您需要医学、法律、投资理财等专业领域的建议,我们强烈建议您独自对内容的可信性进行评估,并咨询相关专业人士。词条信息词条浏览:15514次最近更新:20.10.07编辑次数:4次创建者:阿布突出贡献者:新手指引了解百科编辑规范用户体系商城兑换问题解答关于审核关于编辑关于创建常见问题意见反馈及投诉举报与质疑举报非法用户未通过申诉反馈侵权信息对外合作邮件合作任务领取官方微博微信公众号搜索词条编辑词条 收藏 查看我的收藏分享分享到QQ空间新浪微博投诉登录企业推广免责声明用户协议隐私政策编辑帮助意见反馈及投诉© SOGOU.COM 京ICP备11001839号-1 京公网安备110000020000

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细胞活力检测方法大盘点 - MedChemExpress - 知乎

细胞活力检测方法大盘点 - MedChemExpress - 知乎首发于干货分享切换模式写文章登录/注册细胞活力检测方法大盘点 - MedChemExpressMedChemExpress​已认证账号细胞活力检测产品大 PK 常用的细胞活力检测试剂主要有 MTT、CCK8 等检测方法 (图 1)。MTT法:又称 MTT 比色法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲臜 (Formazan) 并沉积在细胞中,但死细胞无此功能,后经 DMSO 溶解,于 490 nm 处测定吸光值便可间接反应细胞活力。但该方法除去操作步骤耗时以外,生成的 Formazan 是不溶于水的,需经 DMSO 溶解后才能检测,增加了工作量的同时仍不能保证测定结果的准确性,且该溶剂对人体具有明显毒性。CCK8法:相较于 MTT,无论是操作步骤还是检测时间都优化了很多。CCK8 是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度、无放射性的比色检测方法(可看往期推文 CCK-8,让细胞活性检测 So Easy!)。但在实验时,一直有个问题让人很困扰——“细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅”,但这个颜色深浅的标准我 “标” 不出来怎么办?痛点!痛点!痛点! 科研汪 :MTT 作为“元老”级别的检测方法,虽然“老练”,Paper 无数,但麻烦是真麻烦,CCK8 法倒是便捷很多! 小 M:那你是还没用过更便捷的... 科研汪 :莫非你说的是细胞活力检测的“金标准”? 小 M:CTG 细胞活力检测,简单、灵敏、快速的均质检测方法,反应 10 分钟即可得到“Bling Bling”的检测结果,你就说“快不快”?CTG 发光法:基于高灵敏度生物发光检测技术,通过对三磷酸腺苷 (ATP) 进行定量以测定培养物中活细胞数目及细胞活力。该实验方法可用三个字简单概括 “快、准、狠”,比 MTT 的处理速度快近 20 倍,节省时间近 4 小时。CTG 特有的均质检测法即 “加样-混样-检测”,使用时,只需将本试剂等体积添加至培养细胞中即可进行检测。不用感慨,细胞活力检测为什么不能如此简单?图 1. MTT、CCK8 与 CTG 法的实验流程图表 1. MTT、CCK8 与 CTG 法特点比较CTG,适用于哪些实验 首先,来了解实验 CTG 发光法的测定原理:ATP 作为细胞新陈代谢的一个重要指标,与活细胞数目呈良好的线性关系,是细胞活力检测的重要标志性分子。ATP 生物发光的原理为:荧光素酶以荧光素、ATP 和 O2 为底物,在 Mg2+ 存在时,可将化学能转化为光能;在荧光素酶催化的发光反应中,ATP 在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系,即在光信号与酶反应体系中,发光值与 ATP 呈正比,ATP 与活细胞数成正比,CTG 发光法通过 ATP 含量来进行细胞计数或活力测定,且不受化合物自发荧光的影响 (图 2),是细胞增殖测定,细胞活力测定和细胞毒性高通量筛选分析的理想选择。图 2. CTG 法检测原理 ■ 案例 1:细胞增殖测定如图 3 所示,为了探究 SIPL1 对 TNBC 细胞增殖的影响,将 SIPL1 表达载体转染至 BT-549 与 MDA-MB-231 细胞, 并使用 CCK8 法与 CTG 法,进行细胞增殖检测。CCK-8 检测:TNBC 细胞瞬时转染 shRNA 或过表达质粒并培养 24 h 后检测。CTG 发光细胞活力测定:TNBC 细胞在 37°C 下培养过夜。然后,将 100 µL CTG 溶液直接与培养基混合,在室温下培养 20 分钟。结果显示,转染靶向 SIPL1 shRNAs 的 BT-549 和 MDA-MB-231 细胞系的细胞增殖显著降低 (图 3)。图 3. SIPL1 对 TNBC 细胞活力的影响[1]CCK-8 (a) 和 CTG 发光细胞活力测定 (b) 用指示载体转导 BT-549 和MDA-MB-231 细胞增殖能力的分析。■ 案例 2:细胞活力测定如图 4 所示,为了探究外源 RRM2 是否会影响肝癌细胞的铁死亡,在 HepG2 和 SMMC-7721 细胞中过表达或敲除 RRM2,通过 CTG 法检测其对细胞活力的影响。结果表明,过表达 RRM2 时,细胞活力明显增强,反之,敲除 RRM2 时,细胞活力明显降低[1]。图 4. 通过 CTG 法测定 RRM2 对细胞活力的影响[2](a) 在体外表达或敲除 RRM2 的 HepG2 和 SMMC-7721 细胞中测量细胞死亡 (b) 和 4-HNE 水平 (c),然后再用 Fer-1、ZVAD-FMK、Nec-1 或体外表达的 RRM2 进行进一步处理。细胞活力测定采用 CTG 发光细胞活力测定法。■ 案例 3:细胞毒性高通量筛选分析如下图所示,作者团队报告了一种基于浓度-反应曲线的表型定量高通量筛选 (qHTS),旨在识别对疟原虫肝脏和无性血期寄生虫具有活性的化合物 (图 5)。使用 SYBR Green 或荧光素酶来测试对寄生虫生长的抑制,共检测了 456,817 种化合物。在 qHTS 之后,又分类选择了 4,253 种合成易处理的化合物,用于验证抗疟原虫活性和哺乳动物毒性。在 3 μM 和 1 μM 浓度下对化合物进行体外抗伯氏疟原虫肝期寄生虫的评估。其中使用 CTG 法评估了所有 4,253 种化合物对 HepG2 的细胞毒性。其中 255 种化合物对 HepG2 细胞表现出一定程度的生长细胞毒性,AC50 值 < 43 µM (随后被排除)。最终筛选出 994 种经过验证的无毒性化合物,用于针对肝阶段寄生虫的后续评估。图 5. 针对恶性疟原虫无性血期寄生虫的定量高通量筛选[3]。CTG “得宠” 理由汇总图 6. MCE CTG Cell Viability Detection Reagent 与同类产品(竞品)对比测试结果 a. 产品发光稳定性测试(293T 细胞);b. 不同细胞数的线性范围比较 (293T 细胞);c. 不同细胞系的检测结果比较 (293T、H4IIE、Jurkat 细胞)对比测试结果表明:持续 3 h 的生物发光稳定性的检测中,MCE CTG Cell Viability Detection Reagent 的发光信号值比较稳定 (图 5a);不同细胞数的线性范围中,MCE 产品线性关系良好,与进口 竞品线性几乎一致 (图 5b);且对于不同细胞系,MCE 产品与进口竞品检测信号值相当 (图 5c)。综上检测结果表明,MCE CTG 试剂盒可实现稳定、灵敏、批次间差异较小的不同细胞系的细胞活力检测。表 2. MCE CTG Cell Viability Detection Reagent 产品特性靠谱的细胞活力 CTG 检测试剂,尊贵的 VIP 客户体验,想发 SCI 深梦呓语的心。无需按捺您的“蠢蠢欲动”,小 M 早已备好你想要的试用装 (试用装链接)。体验不收费,时间最宝贵~ 快快申领吧!实验小 Tips,附上 CTG 使用注意事项,希望你能早日发 SCI 啦。1. 荧光素酶的活性对温度较为敏感,反复冻融会致其逐渐失活,建议分装冻存,避免反复冻融。冻融时,可能会导致试剂中出现少量沉淀,可平衡至室温后观测沉淀溶解情况,如仍有残留,可离心后去除。2. 本产品在使用或分装时所使用耗材应注意避免 ATP 污染。3. 若待测药物的溶剂含量较高,荧光素酶反应可能会被干扰,致化学发光信号受到影响,可设置含有溶剂的细胞培养液的对照孔以排除此干扰。4. 检测时需使用适合于细胞培养的白色或黑色的多孔板 (96 孔板或 384 孔板),普通透明多孔板的相邻孔之间可能会产生相互干扰。如使用透明板,可使用不透明的白色胶带粘贴孔底。5. 建议在避光环境下进行荧光检测。6. 由于整个发光反应非常迅速,建议加入 CTG 试剂孵育 10 分钟后,立即检测荧光。相关产品:Cell Counting Kit-8Cell Counting Kit-8,简称 CCK-8 试剂盒或 CCK8 试剂盒,是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞活性和细胞毒性检测的快速、高灵敏度试剂盒。CTG Cell Viability Detection ReagentMCE CTG 发光法细胞活力检测试剂盒基于高灵敏度生物发光检测技术,通过对 ATP 进行定量以测定培养物中活细胞数目及细胞活力。Cytotoxicity LDH Assay KitMCE LDH Assay Kit 是通过分析释放到培养上清液中的 LDH 活性而测定细胞损伤的试剂盒。配合使用 CCK-8 (Cat.: No. HY-K0301) 可获得死细胞、活细胞数据。MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务参考文献1. Juanjuan He, Jing Wang, et al. SIPL1, Regulated by MAZ, Promotes Tumor Progression and Predicts Poor Survival in Human Triple-Negative Breast Cancer. Front Oncol. 2021 Dec 17;11:766790. 2. Yueyue Yang, Jiafei Lin, Susu Guo, et al. RRM2 protects against ferroptosis and is a tumor biomarker for liver cancer. Cancer Cell Int. 2020 Dec 7;20(1):587.3. Dorjbal Dorjsuren, Richard T Eastman, et al. Chemoprotective antimalarials identified through quantitative high-throughput screening of Plasmodium blood and liver stage parasites.Sci Rep. 2021 Jan 22;11(1):2121. 发布于 2023-02-18 13:11・IP 属地上海细胞生物学试剂盒​赞同 3​​添加评论​分享​喜欢​收藏​申请转载​文章被以下专栏收录干货分享实验干货,文

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  1993年9月27日,为建设三峡工程,经国务院批准,中国长江三峡工程开发总公司正式成立。2009年9月27日,更名为中国长江三峡集团公司。2017年12月28日,完成公司制改制,由全民所有制企业变更为国有独资公司,名称变更为中国长江三峡集团有限公司(以下简称三峡集团)。在党中央、国务院的坚强领导下,三峡集团历经30年持续快速高质量发展,现已成为全球最大的水电开发运营企业和中国领先的清洁能源集团,成为国务院国资委确定的首批创建世界一流示范企业之一。

  党的十八大以来,习近平总书记多次对三峡集团作出重要讲话指示批示,充分体现了以习近平同志为核心的党中央对三峡集团的高度重视和亲切关怀,为三峡集团做好当前各项工作、谋划未来发展指明了前进方向、提供了根本遵循。根据习近平总书记重要指示批示精神要求,2018年4月,国家发展改革委、国务院国资委明确三峡集团战略发展定位为:主动服务长江经济带发展等国家重大战略,在深度融入长江经济带、共抓长江大保护中发挥骨干主力作用,在促进区域可持续发展中承担基础保障功能,在推动清洁能源产业升级和带动中国水电“走出去”中承担引领责任,推进企业深化改革和创新发展,加快建成具有较强创新能力和全球竞争力的世界一流跨国清洁能源集团。

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1993年9月27日,为建设三峡工程、开发治理长江,经国务院批准,中国长江三峡工程开发总公司正式成立;2009年9月27日更名为中国长江三峡集团公司;2017年12月28日完成公司制改制,由全民所有制企业变更为国有独资公司,名称变更为中国长江三峡集团有限公司(简称中国三峡集团)。经过30多年的持续高质量快速发展,中国三峡集团已经成为全球最大的水电开发运营企业和中国领先的清洁能源集团。

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CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay(CTG 3D)

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CellTiter-Glo®3D Cell Viability Assay(CellTiter-Glo®3D 发光法细胞活力检测试剂盒 ) 通过对 ATP 的定量来测定 3D 培养细胞的细胞活力。ATP 是活细胞新陈代谢的指标。试剂盒提供了即用型的检测试剂,实验前无需预先将冻干底物与反应缓冲液混合,使用方便。 CellTiter-Glo® 3D 细胞活力检测试剂的特殊配方使其拥有更强劲的裂解能力,专门用于检测 3D 细胞培养产生的微组织 (microtissue) 的细胞活力。无需细胞洗涤、去除培养基或多步移液操作,可直接使用单一 CellTiter-Glo® 3D 检测试剂进行均质检测,兼容血清;可应用于多种规格多孔板,适用于高通量筛选 (HTS)。CellTiter-Glo® 3D 检测试剂盒经验证已成功应用于多种方式培养的 3D 微组织的活力检测,包括细胞悬滴培养板 (hanging-drop plate)、超低吸附细胞培养板、Matrigel™ 包被的细胞培养板、琼脂糖包被细胞板、甲基纤维素覆盖培养液和 Alvetex® 三维细胞培养体系中培养的 3D 微组织。

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